一次隔離
在操作控制危險微生物的場所,通常把危險微生物隔離于一定空間內(nèi),這種危險微生物和操作者之間的隔離即為一次隔離,它是以防止操作人員被感染為目的的。實驗室臺面實驗脊椎動物生物安全防護實驗室，其適用微生物范圍與同級的一般生物安全防護實驗室相同。一次隔離主要有三種方式方法,即生物學安全柜。
二次隔離
二次隔離是指實驗室和外界之間的隔離,它是以防止病原體從實驗室漏到外部環(huán)境中感染實驗室外的人為目的的。 由于生物學的危險事例幾乎都發(fā)生在實驗室中,所以一次隔離十分重要,一次隔離實行得越嚴格充分,則實行二次隔離的必要性就可以降低,相應地可以最大化減少隔離費用和降低隔離困難（difficult)程度。在實施二次隔離的情況(Condition)下,生物學安全柜和穿罩式防護衣的人都處于負壓實驗室??隔離區(qū)內(nèi)。簡單一點的隔離做法是在隔離區(qū)外設(shè)常壓維持區(qū),維持區(qū)最好把隔離區(qū)圍起來。
生物安全實驗（experiment)室平面布置 
    1.對有生物危險性的PⅢ實驗室，要做成負壓，以防止微生物感染的外逸。因此它不僅要求除菌、更要進行隔離處理。隔離方式方法一般采用一次隔離和二次隔離。一次隔離就是病原體和實驗者之間的隔離，是以防止實驗人員被感染為目的的。主要用生物安全柜和罩式防護衣方式。 
    2.為了防止病原體從實驗室漏到外部環(huán)境中，而把實驗室和外界阻隔，即是二次隔離。實驗室臺面每類生物安全防護實驗室根據(jù)所處理的微生物及其毒素的危害程度各分為四級。各級實驗室的生物安全防護要求依次為：一級最低，四級最高。二次隔離就是實驗室和外界之間的隔離，是以防止實驗室外的人被感染為目的的。 污染傳播的主要途徑是氣溶膠的擴散和對病原體的直接接觸。特別是前者，僅僅靠改善操作方式是不能解決的，一般采取在隔離區(qū)和維持區(qū)之間建立氣壓差和對排風進行滅菌處理兩種方法。 
    3.隔離區(qū)（PⅢ實驗室）應維持壓差（負壓）一般為-20～-50Pa，使維持區(qū)到隔離區(qū)造成定向氣流。 
    4.在氣壓不同區(qū)域之間設(shè)有氣閘（zhá)室，它的兩邊設(shè)有聯(lián)鎖的門，一邊開時，另一邊關(guān)閉，以維持壓差。微生物實驗室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對健康成年人已知無致病作用的微生物，如用于教學的普通微生物實驗室等。 
    5.整個PⅢ實驗室區(qū)域的室內(nèi)壓差等級從低到高依次是：P-Ⅱ生物安全柜